【曲線(xiàn)特點(diǎn)】：

【類(lèi)型一】某標本內標無(wú)S型擴增曲線(xiàn)。

【類(lèi)型二】外源性?xún)葮顺孰x散型曲線(xiàn)。

【原因分析】：

a) 標本采樣欠佳，沒(méi)有刮取到足夠的鼻咽部細胞。

b) 標本保存不當，核酸降解。

c) 標本加錯位置或漏加。

d) 提取失?。毫呀庖何椿靹颍ㄍ庠葱?xún)葮耍?、提取儀故障等。

e) 擴增失?。郝┘臃磻?、模板加錯孔位、混入抑制擴增反應的干擾物等。

【解決方案】：

a) 重新采集樣本。

b) 送檢標本及時(shí)檢測，室溫放置不超過(guò)4h。

c) 按照規范化流程進(jìn)行相關(guān)操作。

d) 定期對在崗人員進(jìn)行操作考核。

【注】?jì)葮藬U增曲線(xiàn)異常，則該批或相應標本結果無(wú)效，需重新采樣或重新檢測。

02 基線(xiàn)設定不當的異常擴增曲線(xiàn)

【曲線(xiàn)特點(diǎn)】：

軟件默認基線(xiàn)設定的擴增曲線(xiàn)呈波浪型，導致Ct值偏大，可能會(huì )被誤判為陰性。

【原因分析】：

軟件默認基線(xiàn)設定不準確造成擴增曲線(xiàn)異常。

【解決方案】：

根據檢測試劑的要求設定適宜的基線(xiàn)。

03 軟件優(yōu)化造成的異常擴增曲線(xiàn)

【曲線(xiàn)特點(diǎn)】：

軟件優(yōu)化后擴增曲線(xiàn)向斜上方抬起，導致Ct減小，根據優(yōu)化后擴增曲線(xiàn)會(huì )誤判為陽(yáng)性，但原始信號未有明顯擴增。

【原因分析】：

根據設定基線(xiàn)，軟件在自動(dòng)優(yōu)化擴增曲線(xiàn)時(shí)會(huì )放大微小異常信號。

【解決方案】：

查看原始曲線(xiàn)，對基線(xiàn)稍作調整。

【注】自動(dòng)優(yōu)化軟件會(huì )放大微小的異常信號，可根據原始曲線(xiàn)判斷信號真假。

04 多個(gè)標本單靶標通道翹尾

【曲線(xiàn)特點(diǎn)】：

多個(gè)標本出現單靶標通道的擴增曲線(xiàn)翹尾。

【原因分析】：

a) 反應液配制后保存不當，如熒光探針斷裂。

b) 存在陽(yáng)性質(zhì)控污染或者其他熒光物質(zhì)污染。

c) 擴增試劑/耗材的批間差異導致非特異性擴增增加（如試劑更新后Mg2+濃度過(guò)高）。

【解決方案】：

a) 按照說(shuō)明書(shū)要求保存配制的擴增反應液。

b) 提取得到的核酸應及時(shí)進(jìn)行后續處理，否則及時(shí)封蓋，避免混入陽(yáng)性質(zhì)控或其他干擾物；實(shí)驗室每天按時(shí)清潔消毒以消除潛在的干擾因素。

c) 試劑/耗材批號更換前應進(jìn)行比對實(shí)驗驗證。

05 靶標通道呈低平S型曲線(xiàn)

【曲線(xiàn)特點(diǎn)】：

標本靶標通道呈低平且非典型S型擴增曲線(xiàn)，標本與弱陽(yáng)性質(zhì)控的熒光強度存在顯著(zhù)差異。

【原因分析】：

a) 標本存在干擾物質(zhì)。

b) 提取純化不完全。

【解決方案】：

標本重新檢測，必要時(shí)可使用不同的檢測試劑進(jìn)行確認。

【注】對疑似標本建議使用不同的檢測試劑進(jìn)行確認。在異常擴增曲線(xiàn)判斷時(shí)，應根據整批標本的擴增情況（弱陽(yáng)性質(zhì)控擴增曲線(xiàn)）綜合判斷。

06 蒸發(fā)引起的異常擴增曲線(xiàn)

【曲線(xiàn)特點(diǎn)】：

反應體系蒸發(fā)，終體積減少，熒光強度產(chǎn)生變化導致陰性擴增曲線(xiàn)整體呈斜向上或山域型。

【原因分析】：

a) 在擴增過(guò)程中因熱蓋導致管蓋爆裂/光學(xué)膜破裂。

b) 未蓋緊管蓋/刮緊光學(xué)膜。

c) 未使用配套/質(zhì)量合格的耗材。

【解決方案】：

a) 定期檢查擴增儀狀態(tài)，確保熱蓋溫度正常。

b) 上機前蓋緊管蓋/刮緊光學(xué)膜。

c) 使用廠(chǎng)商推薦的合格擴增耗材。

d) 調整基線(xiàn)可適當糾正蒸發(fā)引起的異常信號，有助于后續的擴增曲線(xiàn)判讀。

07 氣泡引起的異常擴增曲線(xiàn)

【曲線(xiàn)特點(diǎn)】：

擴增曲線(xiàn)出現劇烈或明顯曲折。

【原因分析】：

反應體系內有大氣泡形成折射，干擾熒光的采集。

【解決方案】：

a) 加樣時(shí)減少氣泡的產(chǎn)生，同時(shí)上機前可通過(guò)離心減少氣泡。

b) 調整基線(xiàn)可適當糾正氣泡引起的異常信號，有助于后續的擴增曲線(xiàn)判讀。

08 鋸齒形異常擴增曲線(xiàn)

【曲線(xiàn)特點(diǎn)】：

所有通道的擴增曲線(xiàn)出現鋸齒狀。

【原因分析】：

擴增儀電壓不穩、采光或者濾光片故障。

【解決方案】：

檢查擴增儀電壓和光路系統，及時(shí)排除硬件故障，防止后續檢測的異常結果。若擴增儀故障嚴重影響擴增曲線(xiàn)判讀時(shí)應重新檢測。